葉綠素A檢測方法

一、實驗目的

1.了解植物組織中葉綠素的分布及性質。

2.掌握測定葉綠素含量的原理和方法。

二、實驗原理

葉綠素廣泛存在于果蔬等綠色植物組織中，并在植物細胞中與蛋白質結合成葉綠體。當植物細胞死亡后，葉綠素即游離出來，游離葉綠素很不穩定，對光、熱較敏感；在酸性條件下葉綠素綠褐色的脫鎂葉綠素，在稀堿液中可水解成鮮綠色的葉綠酸鹽以及葉綠醇和甲醇。高等植物中葉綠素有兩種：葉綠素a 和b，兩者均易溶于乙醇。

葉綠素的含量測定方法有多種，其中主要有：

1.原子吸收光譜法：通過測定鎂元素的含量，進而間接計算葉綠素的含量。

2.分光光度法：利用分光光度計測定葉綠素提取液在zui大吸收波長下的吸光值，即可用朗伯—比爾定律計算出提取液中各色素的含量。

葉綠素a 和葉綠素b 在645nm 和663nm 處有zui大吸收，且兩吸收曲線相交于652nm 處。因此測定提取液在645nm、663nm、652nm 波長下的吸光值，并根據經驗公式可分別計算出葉綠素a、葉綠素b和總葉綠素的含量。

三、儀器、原料和試劑

儀器：分光光度計、電子頂載天平（感量0.01g）、研缽、棕色容量瓶、小漏斗、定量濾紙、吸水紙、擦境紙、滴管。

原料：新鮮（或烘干）的植物葉片

試劑：1.96％乙醇2. 石英砂；3. 碳酸鈣粉

四、操作步驟

取新鮮植物葉片（或其它綠色組織）或干材料，擦凈組織表面污物，去除中脈剪碎。稱取剪碎的新鮮樣品2g，放入研缽中，加少量石英砂和碳酸鈣粉及3mL95％乙醇，研成均漿，再加乙醇10mL，繼續研磨至組織變白。靜置3～5min。

取濾紙1張置于漏斗中，用乙醇濕潤，沿玻棒把提取液倒入漏斗，濾液流至100mL 棕色容量瓶中；用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘渣數次，zui后連同殘渣一起倒入漏斗中。

用滴管吸取乙醇，將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘渣中無綠色為止。zui后用乙醇定容至100mL，搖勻。

取葉綠體色素提取液在波長665nm、645nm 和652nm 下測定吸光度，以95％乙醇為空白對照。

五、計算

按照實驗原理中提供的經驗公式，分別計算植物材料中葉綠素a、b 和總葉綠素的含量。

上海恒遠生物科技有限公司是一家專注于生命科學和生物技術領域的企業。從事生物技術領域相關產品的開發，銷售和技術服務。我們的主營業務為：ELISA試劑盒，化學試劑，標準品，抗體以及耗材。
 

您對產品有任何問題，可以通過,,與我們公司，我們確保您在zui短時間內得到滿意的回復。我們將不斷提供新產品和新技術資料，并將借助網絡平臺，以讓您能夠認識我們公司，了解我們的產品，獲得。

本公司：m.40rtw.cn ：  何