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      干貨分享:LB培養(yǎng)基怎么配制?

      更新時(shí)間:2020-09-09   點(diǎn)擊次數(shù):22748次

      LB培養(yǎng)基,是微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)大腸桿菌等細(xì)菌,其分為液態(tài)或是加入瓊脂制成的固態(tài)培養(yǎng)基。加入抗生素的 LB 培養(yǎng)基可用于篩選以大腸桿菌為宿主的克隆。

      盡管該培養(yǎng)基的名稱被廣泛解釋為Luria-Bertani 培養(yǎng)基,然而根據(jù)其發(fā)明人貝爾塔尼(Giuseppe Bertani)的說法,這個(gè)名字來源于英語的 lysogeny broth,即溶菌肉湯

      LB培養(yǎng)基的配制:

      1.成分

      胰蛋白胨(tryptone)10g

      酵母提取物(yeast extract)5g

      氯化鈉(NaCl)10g

      固體培養(yǎng)基另加 瓊脂粉 15-20g

      加雙蒸水至1000mL, 用5mol/L NaOH(約0.2ml)調(diào)pH至7.2,121℃滅菌30min


      2.配制方法

      ①稱量 分別稱取所需量的胰化蛋白胨、酵母提取物和NaCl,置于燒杯中。

      ②溶化 加入所需水量2/3的蒸餾水于燒杯中,用玻棒攪拌,使藥品全部溶化。

      ③調(diào)pH 用1mol/L NaOH溶液調(diào)pH至7.2。

      ④定容 將溶液倒入量筒中,加水至所需體積。

      ⑤加瓊脂 加入所需量瓊脂,加熱融化,補(bǔ)足失水。

      ⑥分裝、加塞、包扎。

      ⑦高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。

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